我不想使用EB,我想使用其他电泳染料。

2019-02-11 19:36 来源:网络中心
GelRed和GelGreen是荧光核酸凝胶染色的两种优秀试剂,具有高灵敏度,低毒性和超稳定性。
在所有上述方面,目前大多数商业核酸燃料(凝胶染色试剂)并不完全令人满意。
例如,目前最广泛使用的核酸凝胶染色试剂EB在大多数应用中提供可接受的灵敏度,但它是一种高度诱变的化学物质,并且使用的荧光背景是我们需要变色才能减少。减少背景荧光信号。
SYBRGreenI和SYBRGold也被制造商推广为最敏感的凝胶染色试剂。
然而,SYBR Green I,尤其是SYBR Gold,在常用的微碱性电泳缓冲液或预制凝胶中迅速降解,导致高度不可靠的撕裂结果。
SYBRsafe被认为是市场上更安全的核酸染料,但其染色效果比SYBR GreenI差得多。
GelRed和GelGreen在预成型凝胶和凝胶电泳后都表现出非常高的灵敏度。
设计用于312 nm UV凝胶成像系统,使用我们新的专利测试程序(使用NaCl的稀释溶液代替缓冲液)后凝胶电泳后使用GelRed)传统TBE)它是否优于或至少等同于SYBR?
黄金
然而,与SYBRGold不同,GelRed即使用于预制凝胶也显示出非常高的灵敏度。
我们新开发的GelGreen旨在满足使用488 nm激光凝胶扫描仪或深蓝色激发DarkReader的研究人员的需求。
GelGreen与预先形成的凝胶或凝胶电泳的SYBR Green I相当,但没有稳定性问题。
实际上,GelRed和GelGreen,特别是GelRed非常稳定,它们的10,000种储备溶液可以在室温下长时间储存??。
当两种染料在TBE或类似的电泳缓冲液中稀释时,它们可以在微波炉中加热以适应制备预制凝胶的方法。
含有染料的预制凝胶可以分批制备并储存直至使用。
同样重要的是,与EB和SYBRGreenI相比,GelRed和GelGreen提高了安全性。
独立测试服务公司(Litron Laboratories,Inc。)
进行的标准Ames试验的结果显示在18年。
在浓度为5μg/ ml时(该浓度远高于推荐的3×电泳和染色染色,约4μg/ ml),GelGreen不具有致突变性,而GelRed也具有S9活性只有当其代谢转化时具有弱致突变性
GelRed和GelGreen都具有难以进入细胞的化学结构。这种特殊设计的结构降低了染料的细胞毒性。
相比之下,SYBRGreenI广泛用于活体线粒体细胞和核细胞的DNA染色。这是因为细胞迅速吞噬它们。
由于已知SYBR green I对UV诱导的突变具有强烈的增强作用(Ohta等人。

结果
因此,由于其高细胞膜渗透性,它是紫外线观察中凝胶染色的主要有害物质。
有关更多信息,请从Biotium网站下载完整的GelRed / GelGreen安全报告。